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琼脂糖凝胶电泳实验之凝胶制作与点样
一、琼脂糖凝胶制作1、琼脂糖凝胶浓度配制凝胶的浓度据实验需要而变,一般在0.8%~2.0%之间,如果一次配制凝胶100ml,没用完的凝胶可以再次融化,但随着融化次数的增加,水分丢失也越多,凝胶浓度则会越来越高,导致实验结果不稳定,补水办法:一是在容器上标记煮胶前的刻度,煮胶后补充相应的水分至原刻度;二是在煮胶前称重,煮胶后补充水至原重量。粗略一点的方法是通过多次较恒定的煮胶条件得出一个经验补水值。以保证凝胶浓度基本维持在原浓度。核酸染色剂溴化乙锭(ethidiumbromid...
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2014-12-10
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脂质体2000转染细胞实验材料及操作步骤
一、脂质体2000转染细胞实验材料:1、Vero细胞2、转染级质粒3、DMEM细胞培养液:无血清DMEM、10%血清DMEM4、脂质体20005、6孔细胞培养板二、脂质体2000转染细胞实验操作步骤:(以6孔板为例予以说明)1、细胞铺板:转染前一天进行铺板,第二天待细胞长成单层即可进行转染。(Vero细胞按一传三的比例进行传代,一般10~12h即可。)2、溶液1:240ul无血清DMEM+10ullipofectamine2000perwell(总体积250ul)(温育5mi...
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2014-12-05
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