B27添加剂(50X)是一种经过精心优化的无血清添加剂。它富含神经元生长所必需的多种营养成分,如抗氧化剂、维生素、脂肪酸以及激素等。这些营养物质能够准确地满足细胞代谢的需求,为神经元的健康生长提供了坚实的物质基础。例如,其中的抗氧化成分可以帮助细胞抵御氧化应激造成的损伤,维持细胞的正常结构和功能;而特定的维生素则参与了细胞内的各种生化反应过程,对细胞的生长和分化起着关键的调节作用。
在细胞培养环境中,B27添加剂能够营造一个适宜神经元存活和发展的微环境。它有助于胚胎、出生后乃至成年海马及其他中枢神经系统(CNS)神经元实现低密度或高密度下的良好生长状态,无论是短期还是长期的存活都能得到有效支持。通过与基础培养基(如Neurobasal)配合使用,进一步模拟了体内神经系统的生理条件,促使神经元更好地适应体外培养环境,从而保证实验的准确性和可靠性。
B27添加剂(50X)的使用注意事项:
1.无菌操作:在使用B27添加剂的过程中,必须严格遵守无菌操作原则,防止细菌、真菌等微生物的污染。操作时应戴上手套和口罩,使用经过灭菌的处理工具和容器。
2.正确稀释:该产品为50×浓缩液,使用前务必按照规定的比例用基础培养基进行稀释,不可直接使用未经稀释的原液,否则可能会对细胞产生毒性作用。
3.避光保存:无论是未使用的B27添加剂还是已经添加了该添加剂的培养基,都应置于避光条件下保存。长时间暴露在阳光下可能会导致其中的有效成分分解失效。
4.控制温度:将添加了B27添加剂的培养基放置在2°C-8°C的环境中保存,避免高温影响其稳定性和活性。对于尚未使用的B27添加剂产品本身,可分装后置于-5至-20°C避光保存,但要注意避免反复冻融,以免破坏其结构和功能。
5.避免反复冻融:反复冻融会使B27添加剂中的蛋白质等成分发生变性或聚集,从而降低其生物活性和效果。因此,建议在使用前将产品进行适当分装,每次只取出所需的量进行解冻和使用。
6.注意细胞适应性:不同的细胞系对B27添加剂的反应可能会有所差异,在使用前建议先进行预实验,确定适合该细胞系的添加剂浓度和其他培养条件。
7.与其他试剂的兼容性:如果同时使用多种试剂进行细胞培养,需要注意它们之间是否存在相互作用或兼容性问题。在使用B27添加剂时,要确保它与其他试剂混合后不会产生沉淀、变色或其他不良影响。